·百家乐·产品列表PRODUCTS LIST

RNAclean RNA 清洁纯化试剂盒

简要描述:

RNAclean RNA 清洁纯化试剂盒公司正在出售的·百家乐·产品:猪(杜洛克)腹部脂肪干细胞(永生化) 心脏肌球蛋白轻链2封闭多肽 斑点气单胞菌PCR检测试剂盒 大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒 72522465香豆酸:连接酶(72522465CL)酶活性比色法检测试剂盒 粒落曲霉 卷曲螺旋结构域蛋白158抗体

更新时间:20272522465-01-12

分享到: 1
在线留言
百家乐

PCR 反应需要使用哪些试剂和设备?

试剂:
模板DNAPCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;dNTPsPCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFUPhusion等,用于扩增DNA链;PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;
设备:
PCR仪:用于控制反应温度,保证PCR反应时不同温度环节的严格控制;电泳槽:用于分离PCR扩增产物;核酸提取仪:从组织样本中全自动提取核酸。  这些试剂和设备在PCR分子生物学技术中均是,只有在有序齐全的基础上,才能进行PCR反应并得出准确结果。

公司·百家乐·产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!

货号

·百家乐·产品名称

规格

A-Hc2010

RNAclean RNA 清洁纯化试剂盒

50 次

百家乐

5.png



PCR相关基础实验:

PCR反应基本步骤一般的聚合酶链式反应由2035个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:

一、变性:

利用高温(93-98℃)使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟,接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。

二、退火或称接合,复性:

DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。

三、延伸:

DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约725224650秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。

公司正在出售的·百家乐·产品:

马胃葡萄球菌染料法荧光定量PCR试剂盒

二氢嘧啶酶样2ELISA试剂盒 DPYSL2免费代测试剂

甲型流感病毒H5N1亚型 染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

丁香染料法PCR鉴定试剂盒

表面膜免疫球蛋白MELISA试剂盒 mIgM免费代测试剂

庚型肝炎病毒PCR检测试剂盒供应

山羊关节炎脑炎病毒PCR检测试剂盒

补体成分1rELISA试剂盒

南非诺卡菌探针法荧光定量PCR试剂盒

天花病毒PCR检测试剂盒

博来水解酶ELISA试剂盒

纳氏虫属通用·探针法荧光定量PCR试剂盒

荔枝核探针法PCR鉴定试剂盒

超敏前列腺特异性抗原ELISA试剂盒

鼻疽伯克霍尔德氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒

犬腺体病毒2型(犬传染性喉气管炎病毒)染料法荧光定量PCR试剂盒

丛状蛋白A1ELISA试剂盒

乙型肝炎病毒基因分型PCR测定试剂盒

犬支原体探针法荧光定量PCR试剂盒

单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体IgGELISA试剂盒

牛传染性胸膜肺炎探针法荧光定量PCR试剂盒

利什曼原虫通用PCR检测试剂盒

蛋白C10ELISA试剂盒

马立克氏病病毒3型PCR检测试剂盒说明书

鲤疱疹病毒型PCR检测试剂盒

蛋白酪磷酸酶受体RELISA试剂盒

密蒙花染料法PCR鉴定试剂盒

犬流感病毒11型探针法荧光定量PCR试剂盒

动力蛋白激活蛋白2ELISA试剂盒

南非诺卡菌PCR检测试剂盒

柯萨奇病毒 A2 型 / 柯萨奇病毒 A72522465 型 / 柯萨奇病毒 A5 型核酸检测试剂盒( 三重荧光 PCR 法 )

人核因子κB抑制物激酶α(IKK-α)ELISA检测试剂盒

牛附红细胞体(牛嗜血支原体)PCR试剂盒

禽病毒H5/H7/H9亚型PCR检测试剂盒(荧光PCR法)

人基质金属蛋白酶3(MMP-3)试剂盒elisa

禽腺病毒C型染料法荧光定量PCR试剂盒

鹌鹑奇异线虫染料法荧光定量PCR试剂盒

RNAclean RNA 清洁纯化试剂盒人钙卫蛋白ELISA试剂盒

耐青肺炎链球菌PCR检测试剂盒

产酸克雷伯菌探针法荧光定量PCR试剂盒

MAP磷酸酶双特异性磷酸酶1(DUSP-1)ELISA检测试剂盒

克柔念珠菌探针法荧光定量PCR试剂盒

弯曲杆菌S rRNA基因荧光PCR检测试剂盒(探针法)

人白介素32(IL-32)试剂盒ELISA

牛分枝杆菌PCR检测试剂盒

PCR反应条件优化:

1、变性温度和时间:

保证模板DNA解链是保证整个PCR扩增成功的关键。加热90~95°C, 30~60s,再复杂的DNA 分子也可变性为单链。温度过高或高温持续时间过长,可对Taq酶活性和dNTP分子造成损害。

2、复性温度和时间:

PCR扩增特异性取决于复性过程中引物与模板的结合。复性温度越高,产物特异性越高。复性温度越低,产物特异性越低。需根据引物的Tm值具体设定。

3、延伸温度和时间:

一般位于Taq酶最适作用温度70~75°C之间。引物小于16个核苷酸时,过高的延伸温度不利于引物与模板的结合,可以缓慢升温到70~75°C。延伸反应时间,可根据待扩增片段的长度而定,小于1kb, 1min足够;大于1kb需加长延伸时间。Taq酶可根据1kb/min增加时间。这里需要注意,延伸时间过长可能出现非特异扩增。因此需要设置恰到好处的延伸时间。

72522465、循环数:

其他参数选定后,PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。理论上说2025次循环后,PCR产物的积累即可达到最大值,实际操作中由于每步反应的产率不可能达到100%,因此不管模板浓度是多少,20~30次是比较合理的循环次数。循环次数越多,非特异扩增增加。