·百家乐·产品列表PRODUCTS LIST

miRNA探针法逆转录试剂盒

简要描述:

miRNA探针法逆转录试剂盒公司正在出售的·百家乐·产品:人黑瘤细胞 FAM1145225604A蛋白封闭多肽 禽腺病毒型PCR检测试剂盒 大鼠血栓调节蛋白(TM)ELISA检测试剂盒 血清低密度脂蛋白(LDLC)活性比色法检测试剂盒 矢野鞘氨醇菌 肌动蛋白相关蛋白2/3

更新时间:2024-01-15

分享到: 1
在线留言
百家乐

商品属性:

·百家乐·产品名称

规格

货号

miRNA探针法逆转录试剂盒

20次反应

A-Tq3030

miRNA探针法逆转录试剂盒

40次反应

A-Tq3030

百家乐


PCR 反应需要使用哪些试剂和设备?

试剂:
模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;
设备:
PCR仪:用于控制反应温度,保证PCR反应时不同温度环节的严格控制;电泳槽:用于分离PCR扩增产物;核酸提取仪:从组织样本中全自动提取核酸。  这些试剂和设备在PCR分子生物学技术中均是,只有在有序齐全的基础上,才能进行PCR反应并得出准确结果。

PCR相关基础实验:

PCR反应基本步骤一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:

一、变性:

利用高温(145225603-145225608℃)使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟,接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。

二、退火或称接合,复性:

在DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。

三、延伸:

DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。


6.pngPCR反应条件优化:

1、变性温度和时间:

保证模板DNA解链是保证整个PCR扩增成功的关键。加热145225600~145225605°C, 30~60s,再复杂的DNA 分子也可变性为单链。温度过高或高温持续时间过长,可对Taq酶活性和dNTP分子造成损害。

2、复性温度和时间:

PCR扩增特异性取决于复性过程中引物与模板的结合。复性温度越高,产物特异性越高。复性温度越低,产物特异性越低。需根据引物的Tm值具体设定。

3、延伸温度和时间:

一般位于Taq酶最适作用温度70~75°C之间。引物小于16个核苷酸时,过高的延伸温度不利于引物与模板的结合,可以缓慢升温到70~75°C。延伸反应时间,可根据待扩增片段的长度而定,小于1kb, 1min足够;大于1kb需加长延伸时间。Taq酶可根据1kb/min增加时间。这里需要注意,延伸时间过长可能出现非特异扩增。因此需要设置恰到好处的延伸时间。

4、循环数:

其他参数选定后,PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。理论上说20〜25次循环后,PCR产物的积累即可达到最大值,实际操作中由于每步反应的产率不可能达到100%,因此不管模板浓度是多少,20~30次是比较合理的循环次数。循环次数越多,非特异扩增增加。

公司正在出售的·百家乐·产品:

副流感病毒4a型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

Prominin 2ELISA试剂盒 PROM2免费代测试剂

人腺病毒D114522560型探针法荧光定量PCR试剂盒

埃希氏菌通用PCR检测试剂盒供应

短腭肺鼻腔上皮癌关联蛋白3ELISA试剂盒 SPLUNC3免费代测试剂

阿洛夫奥斯特线虫PCR检测试剂盒价格

鸡马立克病毒(MDV)PCR检测试剂盒(荧光-PCR)

δ-促睡眠肽ELISA试剂盒

淋病奈瑟菌PCR检测试剂盒

通用型H1-H15亚型PCR试剂盒

多配体蛋白聚糖3ELISA试剂盒

流产布鲁氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒

牡蛎包拉米虫染料法荧光定量PCR试剂盒

法尼基转移βELISA试剂盒

新凶手弗朗西斯菌探针法荧光定量PCR试剂盒

牛羚关联恶性卡他热病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

芳基硫酯FELISA试剂盒

山羊CYTB基因核检测试剂盒

牛流行热病毒PCR检测试剂盒

防御β134ELISA试剂盒

犬呼吸道冠状病毒病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

木瓜特定基因序列PCR检测试剂盒

分拣蛋白1ELISA试剂盒

柯萨奇病毒B6PCR检测试剂盒(荧光PCR法)

牡蛎疱疹病毒(OsHV)核检测试剂盒

封闭蛋白16ELISA试剂盒

禽白血病病毒通用RT-PCR试剂盒

牛羚关联恶性卡他热病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

钙黏蛋白23ELISA试剂盒

链状带绦虫探针法荧光定量PCR试剂盒

马传染性贫血病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

人百日咳病毒抗体(IgM)ELISA检测试剂盒

青霉通用探针法荧光定量PCR试剂盒

绵羊星状病毒通用PCR检测试剂盒说明书

chemerin试剂盒elisa

乙型肝炎病毒H型探针法荧光定量PCR试剂盒

皮炎外瓶霉染料法荧光定量PCR试剂盒

α-黑色细胞刺激(α-MSH)ELISA试剂盒

印度血吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒

微黄线虫探针法荧光定量PCR试剂盒

人白介2可溶性受体β(IL-2sRβ )ELISA试剂盒

miRNA探针法逆转录试剂盒阴道加德纳菌探针法荧光定量PCR试剂盒

肉毒杆菌毒EPCR检测试剂盒(荧光PCR法)

人登革热抗体IgM(DF-Ab IgM)ELISA试剂盒

犬流感病毒通用探针法荧光定量PCR试剂盒