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丙酮酸脱氢酶(PDH)试剂盒说明书

简要描述:

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更新时间:2022-01-28

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本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

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检测方法

规格

货号

丙酮酸脱氢酶(PDH)试剂盒说明书

可见分光光度法 微板法

48样 96样

AS301

 

试剂组成和配制

提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。

试剂二:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体×5 瓶,-20℃避光保存。临用前根据用量每瓶加入4.5mL试剂二充分混匀。(3天使用完)

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样品处理

1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,10000g 离心 5min,取全部上清于 4℃、100000g离心30min,弃上清,取沉淀溶于 1mL 试剂一。

2. 细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后于4℃,10000g 离心5min,取全部上清于4℃、100000g 离心30min,弃上清,取沉淀溶于1mL试剂一。

3. 血清:直接测定。

优点如下:

1、快速简便:操作时间短,48-50T,可测40例样本左右,96-100T,可测80例样本左右;

2、取样量微:常规操作取样量50l, 酶标仪操作仅需5l即可检测,部分试剂盒取样多少请;

3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放3个月有效;

4、再现性好:20倍稀释线性仍然良好;

5、回收试验: X =99%;

6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强;

7、测试面广:可测动物血清(浆)、组织、各种体液、灌流液、各种培养细胞以及细胞培养上清液等,部分试剂盒适用于检测植物。

测定步骤:

1.加样

1. 除包被外都需45度加样

2.加样体积要准确

3.管底加样,不能加在管壁上

4.加样时不能产生气泡

2.温浴

1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。

2.各ELISA板不应叠在一起。

3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。

4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。

3.洗涤

1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。

2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。

4.读板

1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。

2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。

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481-49-2千金藤 规格: 20mg

136-47-0丁卡因 规格: 50mg

76674-21-0粉唑;纯品型;标准品;有证书 规格: 0.1g

527-95-7草质 规格: HPLC≥98%,20mg/vial

广防已 规格: 3g

94079-81-9金石蚕;Poliumoside 规格: 20mg

516-35-8牛磺 规格: 20mg

8013-90-9紫罗兰;Ione 规格: 0.1ml

14306-25-3植钠 规格: 25mg